21. In vitro and in vivo correlation of skin and cellular responses to nucleic acid deliveryMaša Omerzel, Katarina Žnidar, A. Sales Conniff, Tanja Jesenko, Boštjan Markelc, Jared Tur, Nina Semenova, Kristopher Kohena, Simona Kranjc Brezar, Loree C. Heller, Maja Čemažar, 2022, original scientific article Abstract: Skin, the largest organ in the body, provides a passive physical barrier against infection and contains elements of the innate and adaptive immune systems. Skin consists of various cells, including keratinocytes, fibroblasts, endothelial cells and immune cells. This diversity of cell types could be important to gene therapies because DNA transfection could elicit different responses in different cell types. Previously, we observed the upregulation and activation of cytosolic DNA sensing pathways in several non-tumor and tumor cell types as well in tumors after the electroporation (electrotransfer) of plasmid DNA (pDNA). Based on this research and the innate immuno- genicity of skin, we correlated the effects of pDNA electrotransfer to fibroblasts and keratinocytes to mouse skin using reverse transcription real-time PCR (RT-qPCR) and several types of protein quantification. After pDNA electrotransfer, the mRNAs of the putative DNA sensors DEAD (AspGlu-Ala-Asp) box polypeptide 60 (Ddx60), absent in melanoma 2 (Aim2), Z-DNA binding protein 1 (Zbp1), interferon activated gene 202 (Ifi202), and interferon-inducible protein 204 (Ifi204) were upregulated in keratinocytes, while Ddx60, Zbp1 and Ifi204 were upregulated in fibroblasts. Increased levels of the mRNAs and proteins of several cytokines and chemokines were detected and varied based on cell type. Mouse skin experiments in vivo confirmed our in vitro results with increased expression of putative DNA sensor mRNAs and of the mRNAs and proteins of several cytokines and chemokines.
Keywords: DNA sensors, cytokines, electrotransfer, skin
Published in DiRROS: 06.09.2022; Views: 635; Downloads: 319
 Full text (7,72 MB)
This document has many files! More... |
22. Genska terapija v onkologiji, prvi razvojni koraki v SlovenijiMaja Čemažar, Tanja Jesenko, Maša Omerzel, Boštjan Markelc, Urška Kamenšek, Simona Kranjc Brezar, Špela Kos, Urša Lampreht Tratar, Katarina Žnidar, Andrej Renčelj, Urška Matkovič, Teja Valant, Kristina Levpušček, Živa Modic, Tilen Komel, Tim Božič, Urša Kešar, Barbara Starešinič, Katja Uršič Valentinuzzi, Monika Savarin, Primož Strojan, Gorana Gašljević, Maja Ota, Aleš Grošelj, Črt Jamšek, Rosana Hudej, Matjaž Peterka, Franc Smrekar, Barbara Hubad, Marjan Hosta, Jaka Kužnik, Alojz Hosta, Damijan Miklavčič, Matej Reberšek, Aleksandra Cvetkoska, Anja Zajc, Janja Dermol-Černe, Nataša Tozon, Nina Milevoj, Alenka Nemec Svete, Gregor Serša, 2022, professional article Abstract: Genska terapija postaja čedalje bolj zanimiva tudi v onkologiji. Med aplikacijami je morda najzanimivejša imunostimulacija. Pripravimo lahko plazmidno DNA, ki nosi zapis za različne imunostimulatorne molekule, ki jih vnesemo v celice tumorjev ali normalnih tkiv. Ta tkiva postanejo proizvajalci teh molekul, ki lahko delujejo lokalno ali pa se izločajo tudi sistemsko v krvni obtok. Ker plazmidna DNA ne prehaja celične membrane, so potrebni dostavni sistemi, virusni ali nevirusni. V naših študijah uporabljamo predvsem nevirusni dostavni sistem – elektroporacijo. Interlevkin 12 (IL-12) je eden od zanimivih citokinov, za katerega je znano protitumorsko delovanje s spodbujanjem imunskega odziva in antiangiogenim delovanjem. Namen projekta SmartGene.si je bil pripraviti plazmid z zapisom za interlevkin 12 (plazmid phIL12) in pripraviti vse potrebno za njegovo klinično testiranje za zdravljenje kožnih tumorjev. V konzorciju smo združili moči s partnerji z akademskega in industrijskega področja. Treba je bilo pripraviti plazmid za uporabo v humani onkologiji po zahtevah Evropske agencije za zdravila (EMA). Za prijavo klinične študije na Javno agencijo za zdravila in medicinske pripomočke (JAZMP) smo morali izvesti tudi vse neklinične raziskave o varnosti in učinkovitosti zdravila. Nato je bilo treba razviti postopek priprave zdravila, zagotoviti primerne prostore za pripravo in izvedbo postopka priprave zdravila. V treh letih smo dosegli vse te zastavljene cilje in dobili dovoljenje za izvajanje klinične študije na kožnih tumorjih, ki ga je izdala JAZMP na osnovi pozitivnega mnenja Komisije Republike Slovenije za medicinsko etiko. Zdaj poteka klinična študija faze I preizkušanja plazmida phIL12 na kožnih tumorjih glave in vratu z namenom preveriti varnost in sprejemljivost genskega elektroprenosa plazmida v tumorje. Cilj študije je prav tako določiti primeren odmerek zdravila, ki bi ga v nadaljnji klinični študiji uporabili kot adjuvantno zdravljenje k ablativnim terapijam, kot sta radioterapija ali elektrokemoterapija.
Keywords: genska terapija, interlevkin-12, plazmidna DNA, elektroprenos genov, rak kože
Published in DiRROS: 01.07.2022; Views: 1266; Downloads: 254
Full text (420,40 KB) |
23. Vzpostavitev in ovrednotenje radioobčutljivosti HPV-pozitivnega mišjega modela ploščatoceličnega karcinoma ustnega predelaŽiva Modic, Maja Čemažar, Simona Kranjc Brezar, Boštjan Markelc, Gregor Serša, Tanja Jesenko, 2022, published scientific conference contribution abstract Keywords: rak ustnega predela, tumorski modeli, eksperimentalna onkologija
Published in DiRROS: 17.06.2022; Views: 701; Downloads: 220
Full text (81,02 KB) |
24. Protitumorska učinkovitost genskega elektroprenosa plazmidne dna z zapisom za rekombinatno protitelo proti CTLA-4 v kombinaciji z obsevanjemBoštjan Markelc, Simona Kranjc Brezar, Tanja Jesenko, Tim Božič, Maja Čemažar, Liesl Jacobs, Kevin Hollevoet, Gregor Serša, 2022, published scientific conference contribution abstract Keywords: obsevanje, genski elektroprenos, eksperimentalna onkologija
Published in DiRROS: 17.06.2022; Views: 705; Downloads: 220
Full text (80,83 KB) |
25. Aktivacija cGAS-STING signalne poti po obsevanju humanih tumorskih modelov karcinomov žrelaKristina Levpušček, Simona Kranjc Brezar, Tanja Jesenko, Gregor Serša, Maja Čemažar, Primož Strojan, 2022, published scientific conference contribution abstract Keywords: rak žrela, tumorski modeli, eksperimentalna onkologija
Published in DiRROS: 17.06.2022; Views: 677; Downloads: 206
Full text (80,79 KB) |
26. Učinki obsevanja dela tumorja na imunske populacije na tumorskem modelu mišjega karcinoma dojke 4T1Tanja Jesenko, Živa Modic, Tim Božič, Simona Kranjc Brezar, Ilija Vojvodić, Božidar Casar, Ignasi Méndez Carot, Maja Čemažar, Gregor Serša, Boštjan Markelc, 2022, published scientific conference contribution abstract Keywords: radioterapija, tumorski modeli, eksperimentalna onkologija
Published in DiRROS: 17.06.2022; Views: 696; Downloads: 195
Full text (80,61 KB) |
27. |
28. |
29. |
30. |
